影響電泳的基本因素有哪些

影響電泳的基本因素有

1．電泳介質的pH值

溶液的pH值決定帶電物質的解離程度，也決定物質所帶淨電荷的多少。對蛋白質，氨基酸等類似兩性電解質，pH值離等電點越遠，粒子所帶電荷越多，泳動速度越快，反之越慢。因此，當分離某一種混合物時，應選擇一種能擴大各種蛋白質所帶電荷量差別的pH值，以利於各種蛋白質的有效分離。為了保證電泳過程中溶液的pH值恆定，必須採用緩衝溶液。

2．緩衝液的離子強度

溶液的離子強度（Ion intensity）是指溶液中各離子的摩爾濃度與離子價數平方的積的總和的1/2。帶電顆粒的遷移率與離子強度的平方根成反比。低離子強度時，遷移率快，但離子強度過低，緩衝液的緩衝容量小，不易維持pH恆定。高離子強度時，遷移率慢，但電泳譜帶要比低離子強度時細窄。通常溶液的離子強度在0.02～0.2之間。

I=1/2∑CiZi2 (I：離子強度Ci：離子的摩爾濃度Zi：離子價數.)

0.154M NaCl溶液的離子強度為：

I= 1/2(0.154×12+0.154×12)=0.154

0.015M Na2SO4溶液的離子強度為：

I= 1/2(0.015×2×12+0.015×22)=0.045

3．電場強度

電場強度（電勢梯度Electric field intensity）是指每釐米的電位降（電位差或電位梯度）。電場強度對電泳速度起著正比作用，電場強度越高，帶電顆粒移動速度越快。根據實驗的需要，電泳可分為兩種：一種是高壓電泳，所用電壓在500～1000V或更高。由於電壓高，電泳時間短（有的樣品需數分鐘），適用於低分子化合物的分離，如氨基酸，無機離子，包括部分聚焦電泳分離及序列電泳的分離等。因電壓高，產熱量大，必須裝有冷卻裝置，否則熱量可引起蛋白質等物質的變性而不能分離，還因發熱引起緩衝液中水分蒸發過多，使支援物（濾紙，薄膜或凝膠等）上離子強度增加，以及引起虹吸現象（電泳槽內液被吸到支援物上）等，都會影響物質的分離。另一種為常壓電泳，產熱量小，室溫在10～25℃分離蛋白質標本是不被破壞的，無需冷卻裝置，一般分離時間長。

4．電滲現象