一代測序又叫什麼
一代測序:又稱Sanger測序(多分子,單克隆)
歷史:第一代DNA測序技術(又稱Sanger測序)在1975年,由Sanger等人開創,並在1977年完成第一個基因組序列(噬菌體X174),全長5375個鹼基。研究人員經過30年的實踐並對技術及測序策略的不斷改進(如使用了不同策略的作圖法、鳥槍法),2001年完成的首個人類基因組圖譜就是以改進了的Sanger法為其測序基礎。
原理:ddNTP的2'和3'都不含羥基,其在DNA的合成過程中不能形成磷酸二酯鍵,可以用來中斷DNA合成反應。在4個DNA合成反應體系(含dNTP)中分別加入一定比例帶有標記的ddNTP(分別為ddATP、ddCTP、ddGTP和ddTTP),通過凝膠電泳和放射自顯影后可以根據電泳帶的位置確定待測分子的DNA序列。
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