rna计算公式

通过测量RNA样品对紫外线（UV）的吸光度来定量，纳滴分光光度计只会使用一到两微升样品，您可以回收这些样品，当然其他分光光度计需要更大的样本。 在1厘米长的光路中，波长为260nm的紫外线在核苷酸处的消光系数为20。基于消光系数，在相同条件下40μg/ ml RNA的吸光度为1。 采用此方法，您可以计算RNA样品的浓度。

如有必要，对样品进行稀释。 微量比色皿的标准稀释度为1:40。 通过将2µL RNA样品加入78µL无菌水中进行稀释。

遵循特定分光光度计的协议，使用空白物校准机器，然后在260nm的UV波长下确定样品的光密度。

将样品的吸光度乘以稀释倍数乘以40μgRNA / mL。 公式为：“ RNA浓度（µg / ml）=（OD260）x（稀释因子）x（40µg RNA / ml）/（1 OD260单位）”（）例如：如果您将样品稀释为 1:40，您的吸光度读数为0.08，则应乘以0.08 x 40 x 40 = 128 µg / ml = 0.13 µg /μL

通过在280nm紫外波长下获取另一个吸光度读数来确定样品的纯度。 OD 260 / OD 280的比率将指示您的样品是否被蛋白质或苯酚污染，以及在什么水平上被蛋白质或苯酚污染。 1.8到2.0的结果表明RNA品质高。

RNA浓度通常计算为1OD =40μg/ ml。将2μl样品稀释至200μl，稀释倍数为100x，因此提取的RNA浓度为0.154×100×40μg/ ml =616μg/ ml。由于RNA量为50μl，提取的RNA总量为616μg/ ml×50 / 1000ml =30.8μg。扩展资料计算原理：蛋白中trp、tyr、phe的吸光度为280nm，所以280nm常用来表示蛋白质吸光度而260nm为DNA的吸光度。

理论上，纯的RNA情况下：OD260/OD280的值为2，纯的DNA情况下：OD260/OD280的值为1.8。OD260反映的是溶液中核酸的浓度，OD280反映的是溶液中蛋白质或者氨基酸的浓度。

样品中如果含有蛋白质及苯酚，A260/A280比值会明显下降。

对于纯的样品只要读出260 nm 的A值即可以算出含量。

通常以A值为1相当于50微克/ml 双螺旋DNA，或者40微克/ml 单链DNA，RNA，或者20微克/ml 寡核苷酸计算。