原核細胞怎麼轉錄
原核生物的RNA聚合酶分子量很大,通常由5個亞基組成σ,β,β′和兩個α亞基,可寫作α2ββ′σ。含有5個亞基的酶叫全酶,失去σ亞基的叫核心酶(α2ββ′)。
核心酶也能催化RNA的合成,但沒有固定的起始點,也不能區分雙鏈DNA的信息鏈與非信息鏈。σ亞基能識別模板上的信息鏈和啓動子,因而保證轉錄能從固定的正確位置開始。β和β′亞基參與和DNA鏈的結合。
轉錄(Transcription)就是以DNA爲模板的RNA的酶促合成。這是基因表達全過程的第一步,並最終導致由基因所編碼的蛋白質的合成。轉錄由RNA酶催化,它需要雙鏈DNA模板與前體核糖核苷酸ATP、GTP、CTP和UTP。
RNA合成的方向總是固定的,即是從RNA分子的5‘→3’。通常兩條DNA鏈中只有一條會轉錄成RNA。
其中一條鏈成爲有義鏈,其RNA的序列就是有義鏈上脫氧核糖核酸序列的拷貝,只是以U代替了T另一條稱爲反義鏈,也稱模板鏈呢,因爲RNA的合成是以它作爲模板的。
1、起始
轉錄的起始涉及RNA聚合酶與雙鏈DNA的結合。RNA聚合酶通常是多亞基酶,它們結合到雙鏈DNA上 ,並在被稱爲啓動子的部位進行轉錄。啓動子是基因起始處的DNA序列,即在編碼區5‘端(上游)。不同基因的啓動子序列元件經常是保守的。不同基因間啓動子的差別會導致轉錄起始效率的差異且與其調控有關。啓動子內短的保守序列是DNA聚合酶或其他DNA結合蛋白的結合位點以起始或者調控轉錄。
爲使模板鏈能與鹼基配對,DNA雙螺旋必須局部解旋。解旋從RNA聚合酶結合的啓動子部位開始,然後聚合酶從一特定的、被稱爲起始位點的核苷酸處起始RNA鏈的合成。這一位點被定義爲基因序列的+1位置。結合到DNA上的RNA聚合酶及其輔助因子通常被稱爲轉錄複合物。
2、延伸
RNA聚合酶向正在增長的RNA鏈的3’端共價地添加核糖核苷酸。因此聚合酶是沿着5‘→3’方向延伸正在增長的RNA鏈。同時酶沿着反義鏈的3‘→5’方向移動。酶移動時局部解旋DNA,使兩條DNA鏈分開,暴露出模板鏈,供核糖核苷酸鹼基互補配對並向增長的RNA鏈共價添加核糖核苷酸。DNA在聚合酶看經過之後有重新形成雙螺旋。37℃時,E·coli RNA聚合酶完成完成該反應的速度是每秒約40個鹼基。
3、終止
轉錄終止,即轉錄複合物的解體和RNA合成的終止,發生在特定的DNA序列,即終止子處。這些序列通常含有一些自身互補區,能夠在RNA產物上形成莖環或髮卡二級結構。這些結構使聚合酶停頓並隨即終止轉錄。
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