細胞凍存液怎麼配

1、 配製含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養液

2、 取對數生長期的細胞，去除舊培養液，用PBS清洗。

3、 去除PBS，加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養皿表面)把單層生長的細胞消化下來

4、 離心1000rpm，5min

5、 去除胰蛋白酶，加入適量配製好的凍存培養液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數，調節凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml

6、 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml

7、 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者

8、 凍存：標準的凍存程式為降溫速率-1～-2℃/min當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h，然後放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內。

細胞凍存液怎麼配

凍存：吸去培養基-pbs洗-胰酶消化-加培養基終止消化-離心-凍存液重懸（可以直接放入-80過夜然後放入液氮）

復甦：用培養基直接吹打凍存管裡的細胞快速融化-離心-培養基重懸-移到培養瓶或皿中-晃勻-培養