rna計算公式

通過測量RNA樣品對紫外線（UV）的吸光度來定量，納滴分光光度計只會使用一到兩微升樣品，您可以回收這些樣品，當然其他分光光度計需要更大的樣本。 在1釐米長的光路中，波長為260nm的紫外線在核苷酸處的消光係數為20。基於消光係數，在相同條件下40μg/ ml RNA的吸光度為1。 採用此方法，您可以計算RNA樣品的濃度。

如有必要，對樣品進行稀釋。 微量比色皿的標準稀釋度為1:40。 通過將2µL RNA樣品加入78µL無菌水中進行稀釋。

遵循特定分光光度計的協議，使用空白物校準機器，然後在260nm的UV波長下確定樣品的光密度。

將樣品的吸光度乘以稀釋倍數乘以40μgRNA / mL。 公式為：“ RNA濃度（µg / ml）=（OD260）x（稀釋因子）x（40µg RNA / ml）/（1 OD260單位）”（）例如：如果您將樣品稀釋為 1:40，您的吸光度讀數為0.08，則應乘以0.08 x 40 x 40 = 128 µg / ml = 0.13 µg /μL

通過在280nm紫外波長下獲取另一個吸光度讀數來確定樣品的純度。 OD 260 / OD 280的比率將指示您的樣品是否被蛋白質或苯酚汙染，以及在什麼水平上被蛋白質或苯酚汙染。 1.8到2.0的結果表明RNA品質高。

RNA濃度通常計算為1OD =40μg/ ml。將2μl樣品稀釋至200μl，稀釋倍數為100x，因此提取的RNA濃度為0.154×100×40μg/ ml =616μg/ ml。由於RNA量為50μl，提取的RNA總量為616μg/ ml×50 / 1000ml =30.8μg。擴充套件資料計算原理：蛋白中trp、tyr、phe的吸光度為280nm，所以280nm常用來表示蛋白質吸光度而260nm為DNA的吸光度。

理論上，純的RNA情況下：OD260/OD280的值為2，純的DNA情況下：OD260/OD280的值為1.8。OD260反映的是溶液中核酸的濃度，OD280反映的是溶液中蛋白質或者氨基酸的濃度。

樣品中如果含有蛋白質及苯酚，A260/A280比值會明顯下降。

對於純的樣品只要讀出260 nm 的A值即可以算出含量。

通常以A值為1相當於50微克/ml 雙螺旋DNA，或者40微克/ml 單鏈DNA，RNA，或者20微克/ml 寡核苷酸計算。