底濾魚缸厭氧技巧

答:魚缸底濾厭氧技巧如下

一、皰肉培養基法

     皰肉培養基法是最簡單的厭氧培養法之一，無需特殊裝置。將皰肉和肉湯裝入大試管，在液麵加入凡士林封閉，從而造成無氧環境。在使用前最好將裝有培養基的試管沸水浴10-20min，以使培養基中溶解的氧釋放出來。

二、厭氧罐法

     厭氧罐法是目前應用較廣泛的一種厭氧培養方法，是用物理化學的方法使缸內造成厭氧環境，從而進行厭氧菌的培養。厭氧罐法又分為以下兩種：

1、抽氣換氣法

     該法適用於一般實驗室，其特點是較經濟，可迅速建立厭氧環境。標本接種後，將平板放入厭氧罐，擰緊蓋子，用真空泵抽出罐中空氣，使壓力真空表至-79.98KPa，停止抽氣，充入高純氮氣使壓力真空表指標回0 位。連續反覆3次，最後在罐內-79.98KPa 的情況下，充入70%的N2、20% H2、10% CO2 (或20% CO2、80% H2)。

      罐中需放入冷催化劑鈀粒，可催化罐中殘餘的O2和H2化合成水。同時罐中應放有美藍指示管，美藍在有氧的環境下呈藍色，無氧時為紅色。臨用前首先將美藍煮沸使變成無色，放入罐中先呈淺藍色，待罐中無氧環境形成，美藍即可持續無色。

2、氣體發生袋法

     氣體發生袋系由錫箔密封包裝，其中含有兩種藥片，一種為含枸椽酸和重碳酸氫鈉的藥片，另一種是含有硼氫化鈉的藥片。前者遇水放出二氧化碳，後者可釋放氫。

      使用時在袋的右上角剪一小口，灌進10ml 蒸餾水，立即放入含有鈀粒、指示劑及平板培養基的厭氧罐中，擰緊蓋子。經2-3 分鐘後，可感到蓋子微熱並有少量水蒸氣出現。密封后1小時左右罐中的O2的含量可低於1%。

三、厭氧袋法

     厭氧袋法即在塑料袋內造成厭氧環境來培養厭氧菌。該方法不需要特殊裝置，操作簡單，使用方便，不但實驗室中可用，而且外出取樣，現場接種等也可用。原理與氣體發生袋法完全相同，只是採用塑料袋代替了厭氧罐，氣袋為一透明而密閉的塑料袋，內裝有氣體發生管(有硼氫化鈉的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿)、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、乾燥劑。其操作方法為首先將接種的平板培養基放入袋中，儘量擠出袋內空氣，然後密封袋口。然後先折斷氣體發生管，20分鐘後再折斷美蘭指示