載體自身環化是什麼意思

把切好的質粒和目的基因放到一起進行連線。在此過程中，質粒不一定就和目的基因連線上，它也有可能會自己再重新連線上，這就叫載體的自身環化。這樣的話我們就沒能把目的基因匯入載體質粒中。

如何避免質粒自身環化：

如果你使用的是酶切連線，選擇不同黏末端的酶一般不會發生自身環化

如果是平端連線，則需要對載體去磷，也就是鹼性磷酸酶處理。此時需要注意你的插入片段兩邊要有磷酸基團（可以引物合成時新增，也可設計平端的酶如EcoRV自己回來切），否則是連不上的。