nbt染色原理
一、原理超氧物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)普遍存在於動、植物體內,是一種清除超氧陰離子自由基的酶。本實驗依據超氧物歧化酶抑制氮藍四唑(NBT)在光下的還原作用來確定酶活性大小。
NBT可作爲一種篩查尿道感染的方法。氯化硝基四氮唑藍(NBT)還原法對血清糖化低密度脂蛋白及極低密度脂蛋白(SG LP-V P)進行測定,依據呈色的深淺直接用光密度表示SG LP-V P的濃度,並計算SG LP-V P的指數,取得的效果非常好
在有氧化物質存在下,核黃素可被光還原,被還原的核黃素在有氧條件下極易再氧化而產生O2,可將氮藍四唑還原爲藍色的甲腙,後者在560nm處有最大吸收。而SOD可清除O2,從而抑制了甲腙的形成。於是光還原反應後,反應液藍色愈深,說明酶活性愈低,反之酶活性愈高。據此可以計算出酶活性大小。
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