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lic克隆步驟

心理1.87W
lic克隆步驟

1、從少量樣品(1-10mg組織或102-104細胞)中提取RNA時可加入少許糖原以促進RNA沉澱。例如加800ml TRIzol勻漿樣品,沉澱RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原會與RNA一同沉澱出來,糖原濃度不高於4mg/ml是不影響第一鏈的合成,也不影響PCR反應。

2.勻漿後加氯仿之前樣品可以在-60至-70℃保存至少一個月。RNA沉澱可以保存於75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。

3.分層和RNA沉澱時也可使用臺式離心機,2600×g離心30-60分鐘。

標籤:克隆 lic