厭氧菌的固體培養方法有

常用的厭氧培養方法有很多種，如皰肉培養基、厭氧罐法、厭氧袋法、厭氧手套箱法等。

一、皰肉培養基法

皰肉培養基法是最簡單的厭氧培養法之一，無需特殊裝置。將皰肉和肉湯裝入大試管，在液麵加入凡士林封閉，從而造成無氧環境。在使用前最好將裝有培養基的試管沸水浴10-20min，以使培養基中溶解的氧釋放出來。

二、厭氧罐法

厭氧罐法是目前應用較廣泛的一種厭氧培養方法，是用物理化學的方法使缸內造成厭氧環境，從而進行厭氧菌的培養。厭氧罐法又分為以下兩種：

1、抽氣換氣法

該法適用於一般實驗室，其特點是較經濟，可迅速建立厭氧環境。標本接種後，將平板放入厭氧罐，擰緊蓋子，用真空泵抽出罐中空氣，使壓力真空表至-79.98KPa，停止抽氣，充入高純氮氣使壓力真空表指標回0 位。連續反覆3次，最後在罐內-79.98KPa 的情況下，充入70%的N2、20% H2、10% CO2 (或20% CO2、80% H2)。

罐中需放入冷催化劑鈀粒，可催化罐中殘餘的O2和H2化合成水。同時罐中應放有美藍指示管，美藍在有氧的環境下呈藍色，無氧時為紅色。臨用前首先將美藍煮沸使變成無色，放入罐中先呈淺藍色，待罐中無氧環境形成，美藍即可持續無色。

2、氣體發生袋法

氣體發生袋系由錫箔密封包裝，其中含有兩種藥片，一種為含枸椽酸和重碳酸氫鈉的藥片，另一種是含有硼氫化鈉的藥片。前者遇水放出二氧化碳，後者可釋放氫。

使用時在袋的右上角剪一小口，灌進10ml 蒸餾水，立即放入含有鈀粒、指示劑及平板培養基的厭氧罐中，擰緊蓋子。經2-3 分鐘後，可感到蓋子微熱並有少量水蒸氣出現。密封后1小時左右罐中的O2的含量可低於1%。

三、厭氧袋法

厭氧袋法即在塑料袋內造成厭氧環境來培養厭氧菌。該方法不需要特殊裝置，操作簡單，使用方便，不但實驗室中可用，而且外出取樣，現場接種等也可用。原理與氣體發生袋法完全相同，只是採用塑料袋代替了厭氧罐，氣袋為一透明而密閉的塑料袋，內裝有氣體發生管(有硼氫化鈉的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿)、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、乾燥劑。其操作方法為首先將接種的平板培養基放入袋中，儘量擠出袋內空氣，然後密封袋口。然後先折斷氣體發生管，20分鐘後再折斷美蘭指示劑管，如果指示劑不變藍色，說明袋內達到厭氧狀態，即可放入37℃ 進行培養。

四、厭氧手套箱法

厭氧手套箱是一整套系統，是最佳的厭氧菌培養法，通常用於厭氧細菌的大量培養研究。厭氧手套箱是一個密閉的大型箱，一般前部是有機玻璃做的透明面板，板上裝有兩個手套，可通過手套在箱內進行操作。厭氧手套箱可調節溫度，本身是孵育箱或孵育箱即附在其內，還可放入解剖顯微鏡便於觀察厭氧菌菌落。使用時應嚴格遵守操作規程，保證箱內氣體比例合理。

常用的厭氧培養方法有許多，可根據實際情況選用：

1．厭氧缸法接種好標本的平板或液體培養基試管，可放入厭氧缸內培養，厭氧缸是普通的乾燥缸，用物理化學的方法使缸內造成厭氧環境，從而將厭氧菌培養出來。

2．厭氧袋（Bio-bag）即在塑料袋內造成厭氧環境來培養厭氧菌。塑料袋透明而不透氣，內裝氣體發生管（有硼氫化鈉的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿）、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、乾燥劑。放入已接種好的平板後，儘量擠出袋內空氣，然後密封袋口。先折斷氣體發生管，後折斷美蘭指示劑管，命名袋內在半小時內造成無氣環境。如不突變表示袋內已達厭氧狀態，可以孵育。

3．厭氧手套箱（Anaerobie glove box）是迄今為止國際上公認的培養厭氧菌最佳 儀器 之一。它是一個密閉的大型金屬箱，箱的前面有一個有機玻璃做的透明面板，板上裝有兩個手套，可通過手套在箱內進行操作，故名。箱側有一交換室，具有內外二門，內門通箱內先關著。欲放物入箱，先開啟外門，放入交換室，關上外門進行抽氣和換氣（H2，CO2，N2）達到厭氧狀態，然後手伸入手套把交換室內門開啟，將物品移入箱內，關上內門。箱內保持厭氧狀態，也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢殘餘氧化合成水的原理。該箱可調節溫度，本身是孵箱或孵箱即附在其內，還可放入解剖顯微鏡便於觀察厭氧菌菌落，這種厭氧箱適於作厭氧細菌的大量培養研究，大量培養基可放入作預還原和厭氧性無菌試驗。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣、厭氧環境和溫度等均系自動調節。

4、厭氧盒：原理同厭氧袋，有成品銷售。

5、 生物 耗氧法：在一密閉的容器內放以 生物 （多是植物），消耗氧氣，同時產生二氧化碳，供細菌生長用。我沒見過。

6、焦性末食子酸法：在一潔淨的玻片上鋪上紗布或濾紙，均勻撒上焦性末食子酸，然後再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液，迅速將已接種細菌的平板倒扣在上面，用融化的白蠟封邊，造成一個封閉空間。焦性末食子酸與鹼反應後耗氧。該法用於厭氧不嚴格的厭氧菌的培養，簡單。如有梭狀芽孢桿菌。

7、皰肉培養基：本身就是一個不需特殊裝置的厭氧培養法。皰肉和肉湯裝入大 試管 ，液麵封凡士林，造成無氧環境。