製備轉基因動物的五個環節
1、目的基因的分離或合成
2、將目的基因與載體DNA連線,構建重組DNA分子——表達載體
3、將重組DNA分子匯入受體細胞,並獲得具有外源基因的個體
4、轉基因生物的檢測與鑑定
5、轉基因生物的安全性評價。
優點是打破了常規育種難以突破的物種之間的界限,可以使原核生物與真核生物之間、動物與植物之間,甚至人與其他生物之間的遺傳資訊進行重組和轉移。人的基因可以轉移到大腸桿菌中表達,細菌的基因可以轉移到植物中表達。
(1)外源目的基因的分離
(2)外源基因與包含啟動子、增強子、報告基因等元件的表達載體拼接重組
(3)重組基因匯入卵或胚胎幹細胞
(4)轉基因胚胎的培養和移植
(5)轉基因胚胎髮育和生長及轉基因動物品系的篩選鑑定
(6)外源基因在轉基因動物的整合率和表達效率的檢測。
轉基因動物的製備在技術上大體包括幾個步驟:
(1)載體的構建(2)介質細胞的獲得和培養(3)DNA的匯入(4)正確重組細胞克隆的篩選(5)將介質細胞參與個體發育,通過受精卵本身發育。
雖然如今轉基因動物技術還在不斷完善和革新的過程中,許多方面的應用尚未進入最終的產業化階段,但隨著理論和技術不斷向前推進,動物轉基因技術和轉基因動物的製備必將對人類的疾病治療、生產生活、社會發展等方面產生巨大的影響。
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