加牛血清的固體培養基怎麼製備

步驟如下

1、用1.8~0.9 倍體積的水溶解粉末狀培養基，不斷攪拌。

•如果是商品化液體培養基，直接加青黴素、鏈黴素儲存液，進入步驟8 。

2、加一定量HEPES 溶液，在終體積培養基中為15mmol/L 。

3、按生產商推薦劑量新增NaHCO3（例如， 5 % CO2壓力下， NaHCO3的濃度為14~36mmol/L) 。

4、加谷氨醯胺，終濃度為0. 01% (w/ v) 加丙酮酸，終濃度為0. 01% (w/v) 。

5、加青黴素G， 終濃度為100IU/ ml 加硫酸鏈黴素，終濃度為50μg/ml 。

6、5mol/L NaOH 溶液調節培養基pH 至7. 4， 補足水至終體積(1 X ) 。如果需要，再調整pH 。

7、用0. 2μm 微孔濾器過濾培養基， 4°C 避光存放。

8、用時按需加入牛血清。