乳酸菌分離和純化常用的方法

乳酸菌的分離純化

1、分離培養基採用MRS培養基， 分離培養基中新增溴甲酚紫作為指示劑

採用稀釋平板塗布法進行平板塗布分離， 挑取直徑在115mm以下能使培養基中溴甲酚紫變紅或變黃的單菌落， 菌落表面光滑的菌株，採用劃線法進行分離純化，獲得純種。

2、MRS 固體培養基：蛋白腖10g，肉膏10g，酵母提取物5g，檸檬酸二銨2g，乙酸鈉5g，K2HPO4 2g，MnSO4·4H2O 0.25g，MgSO4·7H2O 0.58g，葡萄糖20g，吐溫80 1mL，瓊脂25g，水1000mL。調pH6.2～6.4，1% CaCO3，121℃滅菌15min。

乳酸菌分離和純化常用的方法

（1）分離純化乳酸菌時，首先要用無菌水對泡菜濾液進行梯度稀釋．泡菜濾液中乳酸菌的濃度高，直接分離很難分離到單個菌落，因此需要對泡菜濾液進行梯度稀釋．

（2）在分離純化所用的培養基中加入碳酸鈣的作用是中和乳酸菌代謝過程中產生的乳酸和利於乳酸菌的識別和分離分離純化時應挑選出在平板上有透明圈的菌落作為候選菌．

（3）若該同學採用稀釋塗布平板法來檢測泡菜濾液中乳酸菌的含量，先將lmL泡菜濾液稀釋100倍，在3個平板上用塗布法分別接入0．lmL稀釋液，經適當培養後，3個平板上的菌落數分別為39、38和37．據此可得出每毫升濾液中的活菌數為=（39+38+37）÷3÷0.1×100=3.8×10 4 個．

（4）若對篩選得到的乳酸菌進一步純化，宜採用的純化方法是平板劃線法．乳酸菌在20℃長期儲存時，菌液中常需要加入一定量的甘油．