畢氏酵母菌株有哪些
畢赤酵母常用的菌株類
(1) Mut+和Mut s
在畢赤酵母基因組中有2個醇氧化物酶編碼基因,即AOX 1基因和AOX2基因。菌株利用甲醇的速度主要是依靠AOX 1基因表達的AOX 1蛋白,其醇氧化物酶的活性非常高以至於在有AOX 1酶蛋白存在的情況下可以忽略AOX2酶蛋白,這就是甲醇營養型畢赤酵母的兩種表型Mut+和Mut s產生的原理。當菌株基因組中既有AOX 1基因,也有AOX2基因時,菌株的表型為Mut+該菌株有甲醇的培養基中仍可以正常生長。當菌株基因組中僅有AOX2基因時,菌株的表型為Mut s,該菌株在有甲醇的培養基中生長緩慢。
(2)菌株GS115、KM71和SMD1168的區別
GS115、KM71和SMD1168等是用於表達外源蛋白的酵母受體菌。GS115、KM71、SMD1168是組氨酸缺陷型,如果表達載體上攜帶有組氨酸基因,可補償宿主菌的組氨酸缺陷,因此可以在不含組氨酸的培養基上篩選轉化子。這些受體菌自發突變為組氨酸野生型的概率一般低於10-8。 G S 115表型為Mut+ 。重組表達載體轉化G S 115後,長出的轉化子可能是Mut+,也可能是Mut s,可以在MM和MD培養基上鑑定表型。SMD1168和GS115類似,但SMD1168是蛋白酶缺陷型,可降低蛋白酶對外源蛋白的降解作用。KM71沒有AOX 1基因,本身就是Mut s。因此轉化後所有的轉化子都是Mut s,不必鑑定表型。
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