植物蛋白的提取方法
植物組織蛋白質提取方法 1、根據樣品重量(1g 樣品加入 3.5ml 提取液,可根據材料不同適當加入),準備提取液放在冰上。
2、把樣品放在研缽中用液氮研磨,研磨後加入提取液中在冰上靜置(3-4 小時)。
3、用離心機離心 8000rpm40min4℃或 11100rpm20min4℃
植物蛋白質的提取方法有鹽析法、有機溶劑法和等電點法。
鹽析法是指在藥物溶液中加入大量的無機鹽,使某些高分子物質的溶解度降低沉澱析出,而與其他成分分離的方法。鹽析法主要用於蛋白質的分離純化。
機溶劑引起蛋白質沉澱的主要原因是加入有機溶劑使水溶液的介電常數降低,因而增加了兩個相反電荷基團之間的吸引力,促進了蛋白質分子的聚集和沉澱。
在等電點時,蛋白質分子以兩性離子形式存在,其分子淨電荷為零(即正負電荷相等),此時蛋白質分子顆粒在溶液中因沒有相同電荷的相互排斥,分子相互之間的作用力減弱,其顆粒極易碰撞、凝聚而產生沉澱,所以蛋白質在等電點時,其溶解度最小,最易形成沉澱物。
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